甘薯中6花青素(矢车菊素、芍药素、天竺葵素、锦葵素、矮牵牛素、飞燕草素)含量的测定简介

 

 

 

测定原理

 

甘薯中花青素主要以花色苷的形式存在。试样经甲醇-水的盐酸溶液超声提取花色苷后，经沸水浴发生氯化，水解成带氯离子的花青素，用液相色谱-串联质谱法测定，以特征离子对和保留时间定性，外标法定量。

 

 

 

试剂

 

甲酸（CH2O2，CAS号：64-18-6）：色谱纯。

 

甲醇（CH3OH，CAS号：67-56-1）：质谱级。

 

乙腈（C2H3N，CAS号：75-05-8）：质谱级。

 

盐酸（HCl，CAS号：7647-01-0）：优级纯。

 

 

标准品

 

氯化天竺葵素（PelargonidinChloride）：CAS号134-04-3，纯度≥96%。

 

氯化矢车菊素标准品

 

氯化矢车菊素（CyanidinChloride）：CAS号528-58-5，纯度≥96%。

 

氯化芍药素（PeonidinChloride）：CAS号134-01-0，纯度≥96%。

 

氯化锦葵素（MalvidinChloride）：CAS号643-84-5，纯度≥96%。

 

矮牵牛色素标准品

 

氯化矮牵牛素（PetunidinChloride）：CAS号1429-30-7，纯度≥96%。

 

氯化飞燕草素（DelphinidinChloride）：CAS号528-53-0，纯度≥96%。

 

 

单标贮备液

 

1mg/mL的单标储备液：甲醇中氯化天竺葵素、甲醇中氯化矢车菊素、甲醇中氯化芍药素、甲醇中氯化锦葵素、甲醇中氯化矮牵牛素、甲醇中氯化飞燕草素

 

 

步骤

 

试样制备

 

甘薯薯块或叶片样品用冻干机冻干后用粉碎机进行粉碎，过250μm筛后在-20°C环境条件下保存，备用。

 

提取

 

准确称取100mg甘薯冻干粉末放入2mL离心管，加入提取液（5.2.1）1.5mL，振荡均匀，常温超声提取10min，8000r/min常温离心3min，保留沉淀，吸取上清液转移至10mL离心管，反复提取4次，总收集液定容至6mL。

 

水解

 

将收集的上清液于沸水浴中水解1h，取出后自来水冲淋收集上清液的离心管，使溶液冷却至室温，用0.22μm有机相滤膜过滤待测。样品制备后，在4°C避光环境条件下，保存时间不超过3d。7.4液相色谱、质谱条件设置

 

 

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