HJ1364-2024水质阿维菌素 B1a 和阿维菌素 B1b 的测定高效液相色谱法

 

 

 

警告：实验中使用的标准物质和有机溶剂均具有一定的毒性，试剂配制和样品前处理过程应在通风橱内操作，按要求佩戴防护器具，避免直接接触皮肤和衣物。

 

1　适用范围

 

本标准规定了测定水中阿维菌素 B1a 和阿维菌素 B1b 的高效液相色谱法。

 

本标准适用于地表水、地下水、生活污水、工业废水和海水中阿维菌素 B1a 和阿维菌素 B1b 的测定。

 

取样体积 100 mL，进样体积 20 μL 时，阿维菌素 B1a 和阿维菌素 B1b 的方法检出限均为 0.03 μg/L，测定下限均为 0.12 μg/L。

 

2、方法原理

 

样品中阿维菌素 B1a 和阿维菌素 B1b 用二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂萃取，萃取液经净化后浓缩至干，在 N⁃甲基咪唑存在下与三氟乙酸酐衍生化反应生成荧光物质，用高效液相色谱分离，荧光检测器检测。根据保留时间定性，外标法定量。

 

 

3、试剂和材料除

 

1　乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。

 

2　甲醇（CH3OH）：色谱纯。

 

3　二氯甲烷（CH2Cl2）：色谱纯。

 

4　乙腈（CH3CN）：色谱纯。

 

5　盐酸（HCl）：ρ=1.18 g/mL，w∈[36.0%，38.0%]。

 

6 N⁃甲基咪唑（C4H6N2），纯度≥99%。

 

7　三氟乙酸酐（C4F6O3），纯度≥99%。

 

8　氢氧化钠（NaOH）。

 

9　氯化钠（NaCl）。在 400 ℃下烘烤 4 h，冷却至室温，于磨口玻璃瓶中密封保存。

 

10　无水硫酸钠（Na2SO4）。在 400 ℃下烘烤 4 h，冷却至室温，于磨口玻璃瓶中密封保存。

 

11　盐酸溶液。用盐酸（5.5）和水按 1∶1 的体积比混合。

 

12　氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）＝0.4 g/mL。称取 40 g 氢氧化钠（5.8）溶于 100 mL 水中。

 

13　二氯甲烷⁃乙酸乙酯混合溶剂。用二氯甲烷（5.3）和乙酸乙酯（5.1）按 3∶1 的体积比混合。

 

14　衍生化试剂Ⅰ。用 N⁃甲基咪唑（5.6）和乙腈（5.4）按 1∶1 的体积比混合，临用现配。

 

15　衍生化试剂Ⅱ。用三氟乙酸酐（5.7）和乙腈（5.4）按 1∶2 的体积比混合，临用现配。

 

16　阿维菌素 B1（a C48H72O14）：纯度≥90%。-18 ℃以下冷冻、密封、避光保存。

 

17　阿维菌素 B1（b C47H70O14）：纯度≥90%。-18 ℃以下冷冻、密封、避光保存。

 

18　标准贮备液：ρ=100 mg/L。准确称取 1.0 mg 阿维菌素 B1（a 5.16）、1.0 mg 阿维菌素 B1（b 5.17），用乙腈（5.4）溶解后转移至 10 mL容量瓶，乙腈（5.4）定容至标线。-18 ℃以下冷冻，密封、避光保存，保存期 1 年。亦可购买市售阿维菌素 B1a 有证标准物质或阿维菌素 B1b 有证标准物质，按照产品说明书保存。

 

19　标准使用液：ρ=10.0 mg/L。准确移取 500 μL 标准贮备液（5.18）至 5 mL 容量瓶中，用乙腈（5.4）稀释定容至标线，-18 ℃以下冷冻、密封、避光保存，保存期 1 年。

 

20　净化柱：500 mg/6 mL，填料为石墨化碳黑，或其他等效净化柱。

 

21　滤膜：孔径 0.45 μm，聚四氟乙烯或其他等效材质。

 

　阿维菌素 B1a 和阿维菌素 B1b 标准溶液衍生物色谱图

 

标引序号说明：

 

1——阿维菌素 B1b衍生物；

 

2——阿维菌素 B1a衍生物。

 

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