饲料中林可胺类药物的测定液相色谱-串联质谱法

 

 

 

 

 

 

1范围

本文件描述了饲料中林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸酯和吡利霉素的液相色谱-串联质谱测定方法。

 

本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸脂和吡利霉素的测定。

 

本文件的检出限为 10 μg/kg、定量限为 40 μg/kg。

 

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 20195 动物饲料 试样的制备

3术语和定义

 

本文件没有需要界定的术语和定义

4原理

试样中待测物用甲醇-磷酸盐缓冲溶液提取，经混合型强阳离子交换固相取小柱净化，液相色谱串联质谱仪检测,外标法定量。

5试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂

5.1 水;GB/T6682，一级。

5.2 甲酸:色谱纯。

5.3 甲醇:色谱纯

5.4 乙睛:色谱纯。

5.5 盐酸溶液:移取 0.9 mL盐酸，用水稀释至100 mL，混匀。

5.6 磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0)称取 11.411g 三水磷酸氢二钾，加人 430 ml 水溶解，用盐酸溶液(5.5)调节 pH至8.0±0.1，用水释至 500 mL,混匀。

5.7 甲醇-磷酸盐缓冲溶液:取 800 mL 甲醇(5.3)加入 200 mL磷盐缓冲液(5.6),混匀。

5.8 甲酸溶液I:取1m甲酸(5.2)用水稀释至100 mL,混匀。

5.9 甲酸溶液ΙΙ;取 1mL 甲酸(5.2),用水稀释至 1000 mL,混匀。

5.10 氨化甲醇溶液:取 5 mL氨水，用甲醇(5.3)稀释至 100 mL，混匀。

5.11 甲醇溶液:取50 mL甲醇(5.3)用水稀释至100 mL,混匀。

5.12 标准储备溶液(500 μg/ml);分别称取盐酸林可霉素(CAS 号;859-18-7,纯度≥98%),盐酸克林霉素(CAS号:21462-39-5,纯度≥98%)、克林霉素磷酸酯(CAS 号:24729-96-2,纯度≥98%)和盐酸吡利霉素(CAS号;78822-40-9,纯度≥98%)各适量(如所用标准品为相应的盐，则折算成有效成分)(精确至0.01 mg)，用甲醇(5.3)溶解并稀释定容，混匀，制成质量浓度均为 500 μg/ml 的标准储备溶液于-18℃以下保存,有效期 3 个月。

5.13 混合标准中间溶液(10 μg/mL);准确移取标准储备济液(5.12)各 1ml 于50 容量瓶中，用甲醇(5.3)稀释并定容，混匀。于2℃~8℃保存，有效期 7d。

 

5.14 混合标准系列溶液:准确移取混合标准中间溶液(5.13)适量，用甲醇溶液(5.11)配制成质量浓度分别为Iμg/L,2 μg/L,5 μg/L,10 μg/L,50 μg/L100 μg/和 200 μg/L 的混合标准系列溶液。临用现配。

5.15 混合型强阳离子交换固相萃取小柱:500 mg/6 mL或性能相当者。

5.16 微孔滤膜:0,22 um,有机系。

 

6 仪器设备

 

6.1 液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源(ESI)。

6.2 分析天平;精度0.01g和0.01 mg。

6.3 离心机:转速不低于8 000 r/min。

6.4 超声波清洗仪。

6.5 固相萃取装置。

6.6 氮吹仪:控温精度±2℃。

6.7 酸度计:精度±0.01。

 

7样品

 

按 GB/T 20195 制备试样。取样品至少 200 g，粉碎使其全部通过 0.425 mm 孔径的分析筛，充分混匀,装人密闭容器中,备用。

 

 

 

 

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